Inserción
de los fragmentos de ADN. Esta inserción se realiza en vectores
de clonado, que son los agentes transportadores capaces de introducirlos en
las células hospedadoras.
Los vectores de clonación son pequeñas moléculas de ADN, que tienen capacidad para autorreplicarse dentro de las células hospedadoras.
Se utilizan con frecuencia dos tipos de vectores de clonación: plásmidos y virus. de introducirlos en las células hospedadoras.
Plásmidos. Son moléculas de ADN circular,
con un tamaño menor que el del cromosoma. Se replican con independencia del
cromosoma bacteriano ya que tienen su propio origen de replicación.
Los vectores son unidades de ADN
que se autoreplican en un microorganismo o células humanas y los cuales pueden
portar fragmentos de ADN de origen diverso. El vector debe contar con los
elementos que le permitan ser replicados y mantenidos por la maquinaria celular
hospedadora.
Los vectores son propagados en
hospedadores que pueden ser células de E. coli, levadura (S. cerevisiae) o
células mamíferas. Los vectores pueden ser estructuras sencillas como plásmidos
o muy complejos como los cromosomas artificiales de levadura (YAC) (5) y los
cromosomas artificiales mamíferos (MAC) (6).
los vectores tienen diferente capacidad de portar
longitudes variables de secuencias de ADN. Los cromosomas artificiales
mamíferos se vislumbran como vectores de terapia genética de condiciones
causada por genes mayores como el de la distrofina, cuya disfunción causa la
distrofia muscular de Duchenne-Becker, gen que tiene una longitud de secuencia
de 2.4 Mb.
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